1    新型冠状病毒(2019-nCoV)重组抗原及多克隆抗体

新型冠状病毒(2019‑nCoV)IgM/IgG抗体用重组抗原，与新型冠状病毒(2019‑nCoV)的抗体IgG/IgM反应，而不与其它肺部感染性冠状病毒等发生反应，也不与正常人血清发生反应，特异性高。新型冠状病毒(2019‑nCoV)抗体诊断抗原可以利用大肠杆菌重组表达制备，具有抗原表位丰富，检测灵敏度更高，成本较低。本发明提供的多克隆抗体，有望作为用于临床治疗的诊断指标，并开发阻断病毒感染的治疗性抗体。

2    一种以腺病毒为载体的冠状病毒疫苗及其制备方法  

目的氨基酸序列、目的基因序列、包含所述目的基因序列的腺病毒载体、外源转入所述腺病毒载体的细胞以及以包含所述目的氨基酸序列的冠状病毒疫苗。提供了5种冠状病毒疫苗的目标氨基酸以及相应的基因序列，进一步使用腺病毒为载体，以整合腺病毒E1基因的细胞为包装细胞系，经包装获得重组腺病毒载体冠状病毒疫苗。提供的冠状病毒疫苗可以快速制备，适用于新型冠状病毒2019‑nCoV的预防，具有良好的免疫原性，可以诱导高水平的抗体表达。

3    一种针对冠状病毒的核酸疫苗及其制备方法 

包含所述目的基因序列的真核细胞表达载体以及包含所述真核细胞表达载体的核酸疫苗。本发明提供的氨基酸序列为冠状病毒β家族较为保守的序列，且这些序列均能与ACE2结合，是引起免疫反应的重要抗原决定簇。因此，本发明提供的核酸疫苗具有同时预防2003 Sars‑CoV和2019‑nCoV引起的疾病的应用前景。

4    一种针对SARS-CoV-2的重组蛋白疫苗及其制备方法

包含所述目的基因序列的真核细胞表达载体、表达所述目的氨基酸序列的细胞以及包含所述目的氨基酸序列的重组蛋白疫苗。本发明提供的重组蛋白疫苗能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫，且可以快速制备，适用于新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的预防。

5    一种β冠状病毒抗原、β冠状病毒二联疫苗及其制备方法和应用

包括：按照(A‑B)‑(A’‑B’)样式排列的氨基酸序列或(A‑B)‑C‑(A’‑B’)样式排列的氨基酸序列，其中：A‑B表示来自β冠状病毒的表面刺突蛋白的受体结合区的部分氨基酸序列或全部氨基酸序列，A’‑B’表示来自另一种β冠状病毒的表面刺突蛋白的受体结合区的部分氨基酸序列或全部氨基酸序列，C表示连接氨基酸序列，所述β冠状病毒抗原为单链异源二聚体结构。使用该β冠状病毒抗原获得了一种β冠状病毒二联疫苗，该二联疫苗能够刺激小鼠产生强烈的抗体反应。

6    一种COVID-19冠状病毒重组S1蛋白及其应用

还提供了COVID‑19冠状病毒S1重组蛋白的制备方法，该方法能提高S1重组蛋白在真核细胞中表达量，达到55‑70mg/L。本发明的S1重组蛋白与感染了COVID‑19病毒的病人血清或接种了COVID‑19疫苗的动物血清均有交叉反应，可用于制备多克隆抗体和单克隆抗体、开发抗体或抗原的诊断试剂以及设计和筛选COVID‑19冠状病毒治疗药物。S1‑Fc融合蛋白免疫动物后产生的抗体识别COVID‑19冠状病毒，可用于制备冠状病毒疫苗，市场价值巨大。

7    一种新型冠状病毒口服活疫苗及其制备方法

通过转化到减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207进行融合表达，得到的LTB26‑RBD融合蛋白，即构建得到新型冠状病毒口服活疫苗；其中，所述LTB26的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，所述RBD的DNA列如SEQ ID NO.2所示，所述柔性肽linker的DNA序列如SEQ ID NO.3所示，所述LTB26‑RBD融合蛋白的DNA序列如SEQ ID NO.4所示。

8    一种新冠病毒疫苗的表达载体及其构建方法、应用和疫苗

将目的基因片段和载体片段进行连接，得到所述表达载体。本发明实施例通过同时表达冠状病毒S蛋白受体结合区与NP蛋白，使该表达载体感染的细胞不但可以诱导抗体反应还能诱导T细胞反应，从而有效诱导体液免疫和细胞免疫，为受试者提供更强的免疫保护。

9    基于减毒流感病毒载体的新型冠状病毒肺炎疫苗

并且所述病毒株的基因组中含有截短的流感病毒NS1蛋白基因序列。所述减毒流感病毒株可用于制备疫苗，所述疫苗可通过喷鼻免疫方式接种，诱导机体产生针对SARS‑CoV‑2和流感病毒的保护性免疫(包括体液免疫和粘膜免疫)，对新型冠状病毒肺炎和流感具有双重免疫作用。

10    新型冠状病毒S蛋白及其亚单位疫苗

所述新型冠状病毒亚单位疫苗包含所述的重组S蛋白以及药学上接受的佐剂。本发明应用获取的具有生物活性的三聚体构象的S蛋白，制备成三聚体亚单位疫苗，免疫小鼠后能够诱导小鼠产生针对SARS‑CoV‑2的具有免疫保护作用的中和抗体，对免疫小鼠进行新型冠状病毒的致死性攻毒感染后，可以提供100％的保护效率。

11    SARS-CoV-2编码蛋白来源的T细胞表位多肽及其应用

还包含编码所述多肽表位的融合蛋白、核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及包含所述多肽、融合蛋白、核酸分子或载体作为活性成分的药物组合物，以及所述多肽、融合蛋白、核酸分子、载体、药物组合物的用途。

12    一种预防SARS-CoV-2重组蛋白疫苗及其制备方法

提供的重组蛋白疫苗能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫，且可以快速制备，适用于SARS‑CoV‑2的预防。

13    一种DC细胞靶向的纳米SARS-CoV2 S蛋白多肽池疫苗及其制备方法

通过甘露糖修饰纳米颗粒，使疫苗特异性靶向DC细胞，加速DC细胞对SARS‑CoV2抗原的获取，促进DC细胞成熟，高效递呈抗原给CTL细胞，促进CTL细胞增殖，增强CTL细胞杀伤作用，从而提高多肽疫苗的免疫效力。本发明利用生物信息学技术进行多肽预测分析，利用纳米颗粒靶向技术高效激活DC细胞，有效激活抗SARS‑CoV2细胞免疫作用，为防控COVID‑19提供更加安全有效的DC细胞靶向的纳米SARS‑CoV2S蛋白多肽池疫苗。

14    一种双功能抗原、其制备方法及应用

提供的双功能抗原由肺炎球菌荚膜多糖和SARS‑CoV‑2的刺突S蛋白或其片段共价偶联构成；所述双功能抗原中，各血清型的所述肺炎球菌荚膜多糖与所述刺突S蛋白或其片段的质量比为0.2‑2:1。本发明所述的双功能抗原较其使用的刺突S蛋白或其片段抗原自身，能显著提高针对新冠病毒的中和抗体水平；且同时能产生较高水平的针对肺炎球菌荚膜多糖的特异性抗体。

15    抗SARS-CoV-2感染的组合物

提供了抗SARS‑CoV‑2感染的组合物，由S1‑WT蛋白和S1‑Mut蛋白组成，其中，S1‑WT蛋白含有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；S1‑Mut蛋白含有如SEQ ID No.2所示的氨基酸序列，或者在SEQ ID No.2的基础上含有以下至少一种突变：K417N、N501Y、D614G。本发明提供的由S1‑WT蛋白和S1‑Mut蛋白组成的组合物，能够诱导产生SARS‑CoV‑2变异株和野生型病毒的中和抗体，对开发二价重组疫苗的潜在临床应用具有重要意义。

16    一种纳米化的冠状病毒抗原及其应用 

纳米化偶联RBD抗原克服了RBD单体免疫原性不足的缺点，大大提高了小鼠针对2019‑nCoV的中和抗体滴度产生。

17    呈递SARS-COV-2的RBM不同区域肽表位的病毒样颗粒疫苗构建方法 

将该质粒转化大肠杆菌DH5α或BL21感受态细胞上，用IPTG诱导、纯化，得到呈递P2，P3，P4，P6的病毒样颗粒疫苗。只需几次免疫注射该疫苗即可诱导强的针对自身分子的、有持续作用的中和性抗体，以中和新型冠状病毒的感染，为新型冠状病毒疫苗研发提供新思路并奠定坚实基础。

18    重组痘苗病毒、痘苗病毒载体疫苗及其应用与制备方法

所述制备重组痘苗病毒的方法包括将所述重组核酸序列引入痘苗病毒的基因组的目标基因的左臂及右臂之间，得到重组穿梭载体并转染入宿主细胞，形成所述重组痘苗病毒。还公开了编码具有新型冠状病毒S蛋白的重组核酸序列及重组病毒载体。

19    基于纳米颗粒的冠状病毒疫苗

冠状病毒疫苗可用于预防和/或治疗冠状病毒感染。

20    抗新型冠状病毒疫苗及其制备方法

抗新型冠状病毒疫苗为由脂质外层和核糖核酸分子内核构成的纳米颗粒结构，脂质外层由脂质体构成，核糖核酸分子包括用于编码产生靶向溶酶体的第一抗原的mRNA和/或用于编码产生靶向胞质的第二抗原的mRNA，和用于编码产生外分泌的靶向B细胞的第三抗原的mRNA。疫苗能产生多样性的免疫反应。

21    禽传染性支气管炎病毒N蛋白的T细胞抗原表位多肽及其应用  

设计一系列覆盖全长氨基酸序列的重叠肽段，将这些重叠多肽分别刺激淋巴细胞，检测IBV特异性T细胞受多肽刺激后分泌IFN‑γ的水平，初步筛选出功能性T细胞抗原表位多肽，将该功能性T细胞抗原表位多肽分别刺激免疫鸡脾脏淋巴细胞，通过IFN‑γ胞内细胞因子染色试验获得能有效诱导CD8+T淋巴细胞分泌IFN‑γ的肽段。本发明获得的抗原表位多肽具有强免疫原性，可用于制备IBV多表位疫苗，安全性高，特异性好，在IBV的防控工作中具有潜在的应用价值。

22    抗SARS-CoV-2感染的蛋白以及用该蛋白制备的疫苗 

提供了用于预防和/或治疗SARS‑CoV‑2感染的疫苗。本发明主要是通过诱导体内产生抗体等免疫反应，阻断SARS‑CoV‑2的S蛋白与宿主细胞ACE2受体的结合，从而帮助宿主抵抗冠状病毒感染。

23    一种表达新冠病毒Spike蛋白重组副流感病毒5型制备和应用
冠状病毒Spike蛋白突变体的氨基酸序列上不含有Furin蛋白酶裂解位点。结果表明，免疫重组病毒rPIV5‑SH‑Spike组小鼠体内产生抗体针对新冠病毒Spike蛋白的特异性抗体，而rPIV5对照组小鼠未能检测到针对新冠病毒Spike蛋白的特异性抗体。表明rPIV5‑SH‑Spike重组病毒免疫小鼠能够刺激小鼠产生针对Spike蛋白的特异性抗体。

24    一种猫冠状病毒S重组蛋白及其制备方法

首次发现了位于FCoV S2蛋白中的蛋白片段具有良好的反应原性和免疫原性，可作为后续研究和开发FCoV疫苗及相关诊断检测试剂盒的基础。

25    基于流感病毒载体的新型冠状病毒疫苗及其制备方法

这使得该疫苗能诱发两种抗原的免疫反应，达到同时预防流感病毒和新冠肺炎病毒的目的，一次性解决流感和新冠两大传染病对社会经济等带来的影响。同时，流感疫苗基于现有成熟流感平台技术，可大规模制备生产，且流感疫苗使用历史悠久，具有良好安全性。

26    重组慢病毒载体、2019-nCoV假病毒及其制备和应用

采用本发明制备得到的SARS‑CoV‑2假病毒无致病性，具有安全性好，制备效率高，纯度高，且质控方法准确可靠等特性，可长期稳定大量制备，为后续临床广泛应用提供良好基础。

27    新型冠状病毒B．1．1．7英国突变株RBD的基因及其应用 

通过优化野生型新型冠状病毒B．1．1．7英国突变株RBD的基因序列，并结合筛选确定了相对最佳序列，优化后序列产生的克隆表达效率比野生型新型冠状病毒B．1．1．7英国突变株RBD序列表达效率大幅提高，从而，本发明的新型冠状病毒B．1．1．7英国突变株RBD的基因更有利于用于制备新型冠状病毒疫苗。

28    一种新型冠状病毒的mRNA疫苗 

将特异重组质粒进行体外转录，可以得到多聚化TF‑RBD mRNA。进一步的，发明人制备了负载TF‑RBD mRNA的脂质纳米粒。对于新型冠状病毒的防控具有重大的应用推广价值。

29    基于新冠病毒中和抗原表位的多价融合蛋白疫苗

疫苗主要包含了新型冠状病毒突刺蛋白S1区域；具有强烈抗原性并具有广泛人群免疫反应的抗原表位以及具有刺激抗体生成的佐剂；疫苗可以通过皮下或肌肉注射导致系统性免疫，也可通过喷鼻诱导对防止呼吸道病毒具有重要意义的粘膜免疫；通过有选择性地选择关键抗原表位作为免疫原，可以精准产生具有中和性的抗体，避免产生其他非中和性抗体，从而避免潜在的ADE风险，同时避免大量非中和抗体生成所导致过度“免疫消耗”；同时本发明设计和制备所需时间很短，生产简便，可以在新冠病毒，变异新冠病毒，或其他类似病毒发生流行后第一时间内生产和使用；在短时间内达到群体免疫的目的。

30    一种表达冠状病毒受体结合域串联二聚体的重组副流感病毒5型载体

实验证明rPIV5‑tr‑RBD对2019‑nCoV冠状病毒具有优良的免疫保护效果。本发明具有重要的应用价值。

31    新型冠状病毒样颗粒及其制备方法和应用

上述新型冠状病毒样颗粒的制备方法制得的新型冠状病毒样颗粒用于疫苗时具有良好的安全性、稳定性及有效性。

32    新型冠状病毒B.1.351南非突变株RBD的基因及其应用

通过优化野生型新型冠状病毒南非B.1.351南非突变株RBD的基因序列，并结合筛选确定了相对最佳序列，优化后序列产生的克隆表达效率比野生型新型冠状病毒B.1.351南非突变株RBD序列表达效率大幅提高，从而，本发明的新型冠状病毒B.1.351南非突变株RBD的基因可以用于制备新型冠状病毒疫苗。

33    一种提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法

该提高新冠疫苗对特殊人群抗体分泌的动物实验操作方法，自体淋巴细胞通过在体外诱导后进行回输，在实验中可得出数据显示，体外诱导的淋巴细胞自体回输的抗体水平呈跳跃式升高，此实验数据可表明此操作方法可以克服老年人和体弱多病人群对于疫苗反应迟钝或不反应状态，提高特性病毒免疫清除作用，从而减少重症病例的发生率，并且，对于重症病例具有一定的治疗作用。

34    具有异源刺突蛋白的4/91 IBV疫苗  

其编码异源S(刺突)蛋白或其片段。进一步地，本发明涉及一种免疫原性组合物，其包含所述编码异源S(刺突)蛋白或其片段的4/91IBV。再者，本发明涉及用于免疫对象的方法，包括给所述对象施用本发明的免疫原性组合物。此外，本发明涉及在有需要的对象中治疗或预防由IBV引起的临床体征的方法，所述方法包括给对象施用治疗有效量的根据本发明的免疫原性组合物。

35    2019新型冠状病毒N蛋白线性表位肽和单克隆抗体及应用

提供的2019新型冠状病毒N蛋白线性表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑5任一所示。将含有前述线性表位肽的多肽载体蛋白偶联免疫小鼠制备获得多株杂交瘤细胞分泌可以特异性识别2019新型冠状病毒N蛋白且具有生物活性的单克隆抗体。

36    基于水疱性口炎病毒载体的重组新型冠状病毒及其制备方法与应用

 本发明公开了基于水疱性口炎病毒载体的重组新型冠状病毒及其制备方法与应用。所述重组新型冠状病毒为将水疱性口炎病毒的糖蛋白G替换为囊膜蛋白S后得到的病毒；所述囊膜蛋白S包含2019‑nCoV(SARS‑CoV‑2)的囊膜蛋白S胞外区或其部分序列。通过实验证明：本发明的重组新型冠状病毒可以模拟2019‑nCoV(SARS‑CoV‑2)入侵细胞的过程，并能激发机体产生针对2019‑nCoV(SARS‑CoV‑2)的免疫反应，不仅是研究2019‑nCoV(SARS‑CoV‑2)感染过程的理想工具，而且还可以开发成疫苗，对筛选抑制病毒入侵的抑制剂和疫苗研制具有重要意义。

37    三聚体化新冠病毒受体结合域、其制备方法与应用

涉及三聚体化新冠病毒受体结合域、其制备方法与应用。构建了并表达了三聚体化新冠病毒RBD。本发明将目的片段连接至pFastBac1载体，转化到DH10Bac感受态细胞后获得重组杆粒。将重组杆粒转染至sf9细胞后进行病毒拯救，获得重组杆状病毒，将重组杆状病毒接种悬浮sf9细胞96小时后收获培养基进行纯化。PCR及WesternBlot结果显示，重组杆状病毒构建成功，并可以成功表达外源蛋白RBD‑6HB。对纯化后的蛋白进行SDS‑PAGE及WesternBlot鉴定，结果显示，纯化效果良好，为后期的疫苗及基础研究奠定了基础。

38    一种新冠病毒抗原及其制备方法与应用 

新冠病毒抗原包括一种融合蛋白，该融合蛋白包含Spike蛋白S1结构域部分和HSA部分，其中在所述Spike蛋白S1结构域部分中对应于Spike蛋白的第685位精氨酸被替换为甘氨酸。本发明制备的融合蛋白作为新冠病毒血清抗体检测试剂盒中关键抗原成分，用于新冠抗体的检测；作为疫苗给予动物或人产生抗体，用于新冠病毒的预防。作为治疗性药物给予新冠病人，治疗新型冠状病毒肺炎。

39    一种亲和肽在制备抗冠状病毒药物中的应用   

所述的亲和肽包括如SEQ ID NO.1所示的序列或其变体。本发明还公开了该亲和肽在检测冠状病毒中的应用。

40    一种用于防治新冠病毒感染的重组质粒、重组乳酸杆菌表达系统及其应用   

与人体呼吸道、眼结膜、消化道及其它粘膜表面特异性受体(ACE2)结合，从而使得新冠病毒与机体黏膜表面结合的位点被S1蛋白优先占位封闭，进而高效阻断和干扰新冠病毒与人粘膜特异性受体结合，预防新冠肺炎发生，减少新冠肺炎感染人群数量，快速阻遏其全球漫延。

41    一种新型冠状病毒T细胞的抗原表位肽及其应用 

利用其制备得到了pMHC复合物单聚体，进一步制备得到pMHC复合物多聚体，其可以用于新型冠状病毒感染康复者外周血内抗原特异性T细胞的检测，并用于体外的T细胞活化实验，这些新型冠状病毒T细胞抗原表位肽可以应用到新型冠状病毒相关的免疫检测和疫苗研发中，值得深入研究和大力推广。

42    新型冠状病毒肺炎副粘病毒疫苗株及其构建方法 

构建的新型冠状病毒肺炎副粘病毒疫苗株能够稳定高效表达新冠S1蛋白，注射动物后能够诱导机体产生抗体。而且，可以在禽类和犬类中进行实验，能够节约时间、降低成本，同时由于其产量大，更利于实际生产。

43    一种融合蛋白及其在制备新型冠状病毒亚单位疫苗中的应用

通过将SARS‑CoV‑2的棘突蛋白的RBD结构域与免疫球蛋白Fc进行融合表达获得重组融合蛋白，Fc的铰链区以及恒定区能通过二硫键将IgG抗体的两条重链相结合，实现RBD的二聚体，制备的重组融合蛋白可用于作为针对新型冠状病毒肺炎的重组蛋白疫苗。该重组蛋白疫苗可在小鼠体内诱导产生高滴度的特异性IgG抗体和中和抗体，抗体水平可维持3个月以上，该疫苗能同时诱导小鼠产生细胞免疫。

44    针对新型冠状病毒的疫苗以及其应用

首次揭示一种新的改造冠状病毒刺突糖蛋白S1亚基以提高其免疫原性的方法，包括：将冠状病毒刺突糖蛋白S1亚基与定点突变的IgG Fc连接；本发明也揭示了两者融合后获得的融合多肽以及以之与铝佐剂混合后获得的疫苗。本发明的融合多肽能够被有效地表达，表达后能够形成正确的蛋白空间结构，其与铝佐剂混合而获得的疫苗具有良好的免疫原性。

45    一种以痘苗病毒天坛株为载体的新冠疫苗及其构建方法  

用于新冠疫苗的重组病毒的构建方法包括如下步骤：(1)使用引物对P233、P234扩增RBD 5‘端片段，使用引物对p235、p236扩增RBD 3’片段，再通过重叠PCR扩增全长RBD片段，各引物序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示；(2)以pCDNA3.1‑LARA为骨架载体，通过酶切、连接、转化将RBD片段连入骨架载体上，构建重组穿梭质粒pCDNA3.1‑LARA‑S2RBD；(3)通过脂质体介导法将重组穿梭质粒转化到痘苗病毒天坛株中进行同源重组，得到重组病毒，该重组病毒能诱导产生新冠病毒的中和抗体。

46    一种新冠肺炎疫苗以及疫苗套件

所述特异蛋白乙为EBOV的GP蛋白或EBOV GP蛋白的RBD区段。本发明还保护所述重组病毒在制备疫苗中的应用。所述疫苗为SARS‑CoV‑2和EBOV二联疫苗或SARS‑CoV‑2疫苗。本发明对于SARS‑CoV‑2的防控具有重大价值。

47    一种COVID-19亚单位疫苗及其制备方法与应用

利用本发明的融合蛋白与佐剂配置得到的疫苗组合物，可以增加疫苗的溶解度、稳定性，增强疫苗免疫原性，延长疫苗在体内半衰期。本发明的融合蛋白及其疫苗组合物可抑制SARS‑CoV‑2野生型和/或变异型毒株的复制、传播或阻止其在宿主体内定居，从而能有效预防和/或治疗SARS‑CoV‑2野生型和/或变异型毒株引起的新型冠状病毒肺炎。